თხელი ფენის ქრომატოგრაფია არის ქიმიური ანალიზის მეთოდი, რომელიც ემყარება სორბენტული ფენის გამოყენებას 0,1-0,5 მმ სისქით, როგორც სტაციონარული ფაზისთვის. TLC მეთოდი შეიძლება გამოყენებულ იქნას სხვადასხვა სფეროში და საშუალებას იძლევა განისაზღვროს მრავალფეროვანი ქიმიური ნაერთები.
მეთოდის პრინციპი
თხელი ფენის ქრომატოგრაფიის მეთოდი დაიბადა ქაღალდის ქრომატოგრაფიიდან და პირველი ექსპერიმენტები ჩატარდა XIX საუკუნის 80-იან წლებში. ამ ანალიზის აქტიური გამოყენება მხოლოდ 1938 წლის შემდეგ დაიწყო.
TLC ტექნიკა მოიცავს მობილურ ფაზას (ელენთს), სტაციონარულ ფაზას (სორბენტს) და ანალიზს. სტაციონარული ფაზა გამოიყენება და ფიქსირდება სპეციალურ ფირფიტაზე. ფირფიტა შეიძლება გაკეთდეს მინის, ალუმინის ან პლასტმასისგან - ეს არის მრავალჯერადი გამოყენებადი სუბსტრატები, რომლებიც კარგად უნდა გარეცხოთ, გაშრეს და მოამზადოთ სორბენტის გამოყენებისთვის ყოველი გამოყენების შემდეგ. ასევე შესაძლებელია გამოიყენოთ ქაღალდის ფირფიტები, რომლებიც განადგურებულია გამოყენების შემდეგ.
სილიციუმის გელი ყველაზე ხშირად გამოიყენება როგორც სტაციონარული ფაზა, მაგრამ შესაძლებელია სხვა სორბენტების გამოყენება, მაგალითად, ალუმინის ოქსიდი. ამა თუ იმ სორბენტის გამოყენებისას, ტექნოლოგია მკაცრად უნდა დაიცვას, რომ შედეგი ზუსტი იყოს, მაგალითად, რადგან სილიციუმის გელს შეუძლია არასწორი შედეგის მიცემა, თუ ლაბორატორიაში ჰაერი ძალიან ნოტიოა.
გამხსნელები გამოიყენება როგორც მობილური ფაზა, მაგალითად, წყალი, ძმარმჟავა, ეთანოლი, აცეტონი, ბენზოლი. გამხსნელის არჩევანი პასუხისმგებლობით უნდა იქნას მიღებული, რადგან ქრომატოგრაფიის შედეგი პირდაპირ დამოკიდებულია მის თვისებებზე (სიბლანტე, სიმკვრივე, სისუფთავე). თითოეული ანალიზირებული ნიმუშისთვის ირჩევა ინდივიდუალური გამხსნელი.
ანალიზი
ნიმუში უნდა განზავდეს გამხსნელში. თუ სრული დაშლა არ მოხდა და ძალიან ბევრი მინარევი დარჩა, მაშინ ნიმუშის გაწმენდა შესაძლებელია მოპოვების გზით.
ნიმუშის ფირფიტაზე გამოყენება შესაძლებელია ავტომატურად ან ხელით. ავტომატური პროგრამა იყენებს მიკროსპრეის მეთოდს, როდესაც თითოეული ნიმუში იფრქვევა სუბსტრატის შესაბამის არეზე. სახელმძღვანელო გამოყენებისათვის გამოიყენება მიკროპიპეტი. ფანქრის ნიშნები იდება ფირფიტაზე თითოეული ნიმუშისთვის. თითოეული ნიმუში გამოიყენება კაპილარით ფირფიტაზე ერთ ხაზში ნიშნებიდან საკმარის მანძილზე, რათა არ მოხდეს ტყვიის ნახშირბადის რეაქცია.
ფირფიტა მოთავსებულია ჭურჭელში, რომლის ფსკერზე ასხამენ წვნიანს. საყრდენი მოთავსებულია ერთი კიდით ჭურჭელში, აღნიშნულ ხაზამდე. ხომალდი მჭიდროდ არის დახურული, რომ არ მოხდეს მობილური ფაზის აორთქლება. კაპილარული ძალების მოქმედებით, ამოფრქვევი იწყებს სორბენტული ფენის აწევას. როდესაც ელუენტი გარკვეულ დონეს მიაღწევს, ფირფიტა ამოიღება ჭურჭლიდან და აშრება.
თუ სასურველ ნივთიერებას ფერი არ აქვს, მაშინ ის სუბსტრატზე არ ჩანს. ამიტომ ტარდება ვიზუალიზაცია - ფირფიტის დამუშავება იოდის ორთქლით ან სხვა საღებავებით.
ამგვარი დამუშავების შემდეგ ხდება შედეგის შეფასება. სხვადასხვა ინტენსივობის ფერადი ადგილები ჩნდება სორბენტზე. ნივთიერების (ან ნივთიერებათა ჯგუფის) დასადგენად, ფერადი ადგილები, მათი ზომა, ინტენსივობა და მობილობა შედარებულია საცნობარო ნიმუშთან.
TLC მეთოდი ფართოდ გამოიყენება, რადგან ის არის სწრაფი, იაფი, ზუსტი, ინტუიციური, არ საჭიროებს რთულ აღჭურვილობას და მისი ინტერპრეტაცია მარტივია.
